一种鱼溶浆蛋白肥的制备方法与流程

来源:凯发国际官网首页    发布时间:2024-02-17 14:53:32

  鱼溶浆是鱼粉生产的全部过程中产生的压榨废水。早期鱼粉生产的基本工艺过程中,鱼溶浆通常不经回收直接向环境中排放,造成了严重的环境污染。鱼溶浆中富有丰富的优质蛋白,据p.j.bechtel,univ.ofalaska报道,鱼溶浆含蛋白6%,木瓜蛋白酶消化率大于95%,可溶性蛋白占70%,采取了适当方法回收后的鱼溶浆蛋白能够适用于饲料工业,用作动物饲料的原料。近年来,有关鱼溶浆回收利用的方法已有较多研究,如把鱼溶浆加入鱼粉中烘干(中国专利cn5.9),或经脱油、脱粘多糖处理后干燥成鱼溶浆蛋白粉(中国专利cn6.5)等。由于鱼溶浆含鱼体组织中的可溶性蛋白和游离氨基酸,可将鱼溶浆加工成蛋白粉。但鱼溶浆中蛋白质分子量较大,并有较强的鱼腥气味,需要分解成小分子蛋白并去腥。

  现有技术如授权公告号为cn102994601b的中国发明专利一种利用海洋胶原蛋白酶mcp-01制备胶原蛋白小肽的方法,包括如下步骤:(1)将海洋胶原蛋白酶mcp-01溶于tris-hcl缓冲液中,配成酶浓度为0.3~0.5mg/ml的酶液;(2)将牛肌腱i型不可溶胶原蛋白加入酶液中,在水浴锅中反应,在4℃条件下,离心后超滤,制得胶原蛋白小肽。该方法生产的胶原蛋白小肽分子量小但小肽的生物活性不强,功能性较弱。

  本发明的目的是提供一种能得到分子量小、活性高的蛋白肥,原料利用率高的利用鱼溶浆生产蛋白肥的制备方法。

  本发明针对背景技术中提到的问题,采取的技术方案为:一种利用鱼溶浆生产蛋白肥的方法,包括以下步骤:

  脱脂:在鱼溶浆中加入有机溶剂,采用索氏提取法脱脂,有机溶剂为丙酮和乙醇混合物,体积比为1:1~3,鱼溶浆与有机溶剂体积比为1:2~3。反应温度为70~85℃,反应时间为2~3h,重复2~4次。利用相似相容原理,鱼溶浆中脂肪溶解于有机溶剂中,同时蛋白质不溶于有机溶剂,脂肪随有机溶剂蒸馏,与蛋白质分离开来,得到脱脂后的鱼溶浆;

  分步酶解:在鱼溶浆中加入胃蛋白酶,采用红外线控温,酶解,胃蛋白酶添加量0.6~1.4%,ph为2.0~3.5,酶解温度为37~39℃,酶解时间为10~15min。酶解结束后灭酶,鱼溶浆中的蛋白质存在大量胃蛋白酶的酶切位点,胃蛋白酶对其的酶解效率高且得到的蛋白质分子量小,容易被人体消化吸收。调节ph后再加入木瓜蛋白酶酶解,采用红外线控温,木瓜蛋白酶加入量为0.2~0.4%,ph为6.0~7.0,温度为50~55℃,酶解时间为4~7min。胃蛋白酶酶切后的蛋白质暴露了很多木瓜蛋白酶的酶切位点,木瓜蛋白酶对上述蛋白质继续酶解,进一步减小蛋白质的分子量。沸水浴灭酶3~7min,过滤取滤液;

  超滤:将去腥后的滤液超滤,超滤膜规格为1~2kda,取滤过液。通过超滤可去除分子量大的杂质,对鱼蛋白进行纯化,提升产品质量;

  喷雾干燥:将脱盐液体喷雾干燥得到蛋白粉。蛋白粉中含有氨基酸序列为hshacasysrcycrclrcvlhpgcvncycrcsr的活性多肽。上述活性多肽能抑制真菌中的根肿菌纲、壶菌纲和细菌中的癌肿野杆菌的生长,大幅度的降低植物根部形成肿瘤的概率,提高植物的存活率;

  蛋白肥的制备:在100份蛋白粉中加入20~30份氮磷钾肥和3~5份植物生长调节剂即得蛋白肥。

  与现有技术相比,本发明的优点是:1)本发明以鱼溶浆为原料,既保护了环境,又对资源进行了合理运用,增加了鱼溶浆的附加值;2)本发明制备的蛋白肥,分子量小,蛋白纯度和活性高,产品质量优异,可全面提供植物生长所需的营养的东西,还可作用到秧苗上,优化秧苗基因,提高植物的持水能力;3)能抑制真菌中的根肿菌纲、壶菌纲和细菌中的癌肿野杆菌的生长,大幅度的降低植物根部形成肿瘤的概率,提高植物的存活率;4)本发明酶解时采用红外线控温,快速缩短生产周期,减少时间成本和人力成本,加工方法简单,重现性高,适合大规模生产。

  1)脱脂:在鱼溶浆中加入有机溶剂,采用索氏提取法脱脂,有机溶剂为丙酮和乙醇混合物,体积比为1:1~3,鱼溶浆与有机溶剂体积比为1:2~3。反应温度为70~85℃,反应时间为2~3h,重复2~4次。利用相似相容原理,鱼溶浆中脂肪溶解于有机溶剂中,同时蛋白质不溶于有机溶剂,脂肪随有机溶剂蒸馏,与蛋白质分离开来,得到脱脂后的鱼溶浆;

  2)分步酶解:在鱼溶浆中加入胃蛋白酶,采用红外线控温,酶解,胃蛋白酶添加量0.6~1.4%,ph为2.0~3.5,酶解温度为37~39℃,酶解时间为10~15min。酶解结束后灭酶,鱼溶浆中的蛋白质存在大量胃蛋白酶的酶切位点,胃蛋白酶对其的酶解效率高且得到的蛋白质分子量小,容易被人体消化吸收。调节ph后再加入木瓜蛋白酶酶解,采用红外线控温,木瓜蛋白酶加入量为0.2~0.4%,ph为6.0~7.0,温度为50~55℃,酶解时间为4~7min。胃蛋白酶酶切后的蛋白质暴露了很多木瓜蛋白酶的酶切位点,木瓜蛋白酶对上述蛋白质继续酶解,进一步减小蛋白质的分子量。沸水浴灭酶3~7min,过滤取滤液;

  3)超滤:将去腥后的滤液超滤,超滤膜规格为1~2kda,取滤过液。通过超滤可去除分子量大的杂质,对鱼蛋白进行纯化,提升产品质量;

  5)喷雾干燥:将脱盐液体喷雾干燥得到蛋白粉。蛋白粉中含有氨基酸序列为hshacasysrcycrclrcvlhpgcvncycrcsr的活性多肽。上述活性多肽能抑制真菌中的根肿菌纲、壶菌纲和细菌中的癌肿野杆菌的生长,大幅度的降低植物根部形成肿瘤的概率,提高植物的存活率;

  6)蛋白肥的制备:在100份蛋白粉中加入20~30份氮磷钾肥和3~5份植物生长调节剂即得蛋白肥。

  1)脱脂:在鱼溶浆中加入有机溶剂,采用索氏提取法脱脂,有机溶剂为丙酮和乙醇混合物,体积比为1:2,鱼溶浆与有机溶剂体积比为1:2.4。反应温度为76℃,反应时间为2.6h,重复2次。利用相似相容原理,鱼溶浆中脂肪溶解于有机溶剂中,同时蛋白质不溶于有机溶剂,脂肪随有机溶剂蒸馏,与蛋白质分离开来,得到脱脂后的鱼溶浆;

  2)分步酶解:在鱼溶浆中加入胃蛋白酶,采用红外线控温,酶解,胃蛋白酶添加量1.2%,ph为2.0,酶解温度为38℃,酶解时间为12min。酶解结束后灭酶,鱼溶浆中的蛋白质存在大量胃蛋白酶的酶切位点,胃蛋白酶对其的酶解效率高且得到的蛋白质分子量小,容易被人体消化吸收。调节ph后再加入木瓜蛋白酶酶解,采用红外线控温,木瓜蛋白酶加入量为0.3%,ph为6.5,温度为53℃,酶解时间为6min。胃蛋白酶酶切后的蛋白质暴露了很多木瓜蛋白酶的酶切位点,木瓜蛋白酶对上述蛋白质继续酶解,进一步减小蛋白质的分子量。沸水浴灭酶3min,过滤取滤液;

  3)超滤:将去腥后的滤液超滤,超滤膜规格为1.5kda,取滤过液。通过超滤可去除分子量大的杂质,对鱼蛋白进行纯化,提升产品质量;

  5)喷雾干燥:将脱盐液体喷雾干燥得到蛋白粉。蛋白粉中含有氨基酸序列为hshacasysrcycrclrcvlhpgcvncycrcsr的活性多肽。上述活性多肽能抑制真菌中的根肿菌纲、壶菌纲和细菌中的癌肿野杆菌的生长,大幅度的降低植物根部形成肿瘤的概率,提高植物的存活率;

  6)蛋白肥的制备:在100份蛋白粉中加入26份氮磷钾肥和3份植物生长调节剂即得蛋白肥。

  1)脱脂:在鱼溶浆中加入有机溶剂,采用索氏提取法脱脂,有机溶剂为丙酮和乙醇混合物,体积比为1:1.5,鱼溶浆与有机溶剂体积比为1:2.7。反应温度为75℃,反应时间为2.3h,重复3次。利用相似相容原理,鱼溶浆中脂肪溶解于有机溶剂中,同时蛋白质不溶于有机溶剂,脂肪随有机溶剂蒸馏,与蛋白质分离开来,得到脱脂后的鱼溶浆;

  2)分步酶解:在鱼溶浆中加入胃蛋白酶,采用红外线控温,酶解,胃蛋白酶添加量1%,ph为2.0,酶解温度为38℃,酶解时间为13min。酶解结束后灭酶,鱼溶浆中的蛋白质存在大量胃蛋白酶的酶切位点,胃蛋白酶对其的酶解效率高且得到的蛋白质分子量小,容易被人体消化吸收。调节ph后再加入木瓜蛋白酶酶解,采用红外线控温,木瓜蛋白酶加入量为0.3%,ph为6.5,温度为53℃,酶解时间为6min。胃蛋白酶酶切后的蛋白质暴露了很多木瓜蛋白酶的酶切位点,木瓜蛋白酶对上述蛋白质继续酶解,进一步减小蛋白质的分子量。沸水浴灭酶4min,过滤取滤液;

  3)超滤:将去腥后的滤液超滤,超滤膜规格为1.3kda,取滤过液。通过超滤可去除分子量大的杂质,对鱼蛋白进行纯化,提升产品质量;

  5)喷雾干燥:将脱盐液体喷雾干燥得到蛋白粉。蛋白粉中含有氨基酸序列为hshacasysrcycrclrcvlhpgcvncycrcsr的活性多肽。上述活性多肽能抑制真菌中的根肿菌纲、壶菌纲和细菌中的癌肿野杆菌的生长,大幅度的降低植物根部形成肿瘤的概率,提高植物的存活率;

  6)蛋白肥的制备:在100份蛋白粉中加入24份氮磷钾肥和4份植物生长调节剂即得蛋白肥。

  以上所述的实施例对本发明的技术方案进行了详细说明,应理解的是以上所述仅为本发明的具体实施例,并不用于限制本发明,凡在本发明的原则范围内所做的任何修改、补充或类似方式替代等,均应包含在本发明的保护范围之内。

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